ENZYME ENGINEERING KNOWLEDGE PLATFORM
酶学知识平台
把性能目标翻译成突变路径：先看主流方法、原理与设备边界，再按目标生成可执行的实验方案、判读闸门与文献约束的模拟结果。模拟只用于方案设计，不替代湿实验。
① 选酶种 + 性能方向② 看文献支持的路径③ 读实验方案④ 看模拟与判读⑤ 回文献核原文
① 酶突变筛选的主流方法
按“随机 / 半理性 / 选择 / 超高通量 / 计算”分层；不是所有方法都需要液滴分选或 NGS。
选法原则：没有结构信息先做易错 PCR/CSR 探空间；有结构或热点先做 ISM/CASTing；库容 >10^6 再考虑液滴微流控；已有 10^3+ 标注变体再上机器学习。不要一上来就买最贵的设备。
② 选择性能方向，生成突变路径
路径不是“唯一答案”；每条路线都给出方法、建库、筛选、预期与风险，按证据强度排序。
正在准备…
怎么读：“证据较强”= 有同行评审的定量锚点；“中等/需验证”= 有文献但需要换底盘/体系复现；“探索性”= 机制合理但公开定量证据弱。没有专属路线时会明确给通用组合，不硬造。
③ 实验操作与设备
六段式：基线 → 建库 → 初筛 → 复筛 → 纯化机制 → 决策；每段都有闸门。
选择上方路线后显示实验方案。
④ 模拟实验结果
文献锚点 + 模型假设；有定量锚点才画曲线/数值，没有就只做定性判读矩阵。
选择路线后显示文献约束模拟。
⑤ 结果判读
先看筛选窗是否可信，再看 Hit 是否真实；不要用单次高信号做结论。
⑥ 文献与边界
方法学、突变锚点、模拟参数逐条列出来源；
三条硬边界：① 模拟值不是湿实验数据，不能写成产品规格；② 商业酶性能不能反推突变位点；③ 没有定量锚点的方向只给定性判读，不编数字。要对外承诺，必须用宝锐底盘酶在目标基质中做实测。