--- title: 宝锐生命科学知识百宝书v01 origin: 公用/书籍/宝锐生命科学知识百宝书v01.docx ext: .docx line: 公用 converted: 2026-09-11 source_mtime: 2026-04-23 auto: true confidence: raw words: 3795 truncated: false --- # 宝锐生命科学知识百宝书v01 > 自动转卡（原件：`公用/书籍/宝锐生命科学知识百宝书v01.docx`）｜本卡由机器抽取，未经人工确认；数值口径以原件为准。 宝锐生命科学知识百宝书 v01 — 2026年上半年 # 一、mRNA疫苗/体外转录（IVT）合成全流程 ## 1. 模板制备 BP-E09 — BspQ I (限制性内切酶) | 活性极高，用量比竞品少两个数量级 BP-E10 — Bsa I (限制性内切酶) | 用于制备含完整poly(A)的模板 BP-E16 — EcoR I (限制性内切酶) | 活性高，低酶量下仍可完全酶切 ## 2. 体外转录 BP-E01 — T7 RNA聚合酶 | 活性高，稳定性强（37℃加速9天产量不变） BP-E14 — Thermostable T7 RNA聚合酶 | 耐高温50-52℃，可降低dsRNA副产物 BP-E11 — T7 RNA聚合酶 3.0 | 核心优势：显著降低dsRNA副产物 BP-E03 — 无机焦磷酸酶 | 大幅提升转录产量 BP-E02 — RNase Inhibitor | 有效防止RNA降解 BP-AS-01等 — NTP/修饰核苷酸溶液 | 纯度>99.5% ## 3. 模板消化 BP-E04 — DNase I | 活性高，消化等量模板投料与竞品呈数量级差异 ## 4. 加帽 BP-E05 — 牛痘病毒加帽酶(VCE) | 可实现100%加帽率，生成Cap0结构 BP-E06 — 二氧甲基转移酶(2OM) | Cap0→Cap1，降低mRNA免疫原性 BP-AS-06 — SAM（S-腺苷甲硫氨酸） ## 5. 纯化与质控 BP-E08 — RNase R | 特异性消化线性RNA，用于circRNA富集 BP-18-96 — dsRNA残留定量检测试剂盒2.0 | 检测时间短，灵敏度0.047ng/mL BP-05-10/BP-12-10 — mRNA加帽率检测前处理试剂盒 BP-11-10 — Poly(A)尾分布检测前处理试剂盒 BP-16-100 — DNase残留定量检测试剂盒 | 灵敏度1.25×10⁻⁶U BP-06-100 — RNase残留定量检测试剂盒 | 灵敏度0.078pg RNase A ## 6. 试剂盒方案 BP-01-50 — T7高效转录试剂盒 | 单组分，转录产量高(1µg模板获200µg以上产物) BP-04-50 — mRNA加帽试剂盒 | 含VCE和2OM，一管反应直接获得Cap1 BP-13-50 — CircRNA合成试剂盒 | 操作简单，环化产物纯度高 BP-17-20 — CircRNA合成试剂盒（一步法） BP-21-50 — dsRNA合成试剂盒 | 纯度可达85%以上 BP-S03-10 — circRNA分离预制胶试剂盒 # 二、分子克隆与基因工程全流程 ## 1. 目的片段获取 BR1A401系列 — HandyAmp Fast Premix | PCR扩增极快(1-30sec/kb)，兼容粗提模板、高/低GC含量 BR3M121系列 — 2×Super-Fidelity Master Mix | 保真性约为普通Taq的154倍，可扩增30kb ## 2. 载体与片段准备 BP-E09/Bsa I/EcoR I等 — 各种限制性内切酶 | 活性高，特异性强 BR2A103-01/02 — Gel DNA Purification Kit | 凝胶回收+PCR产物纯化 ## 3. 连接/重组 BR1C101系列 — 2×Seamless Cloning Premix | 无缝克隆，基于同源重组，高效精准 BR3P301 — T4 DNA Ligase | 催化DNA连接反应 ## 4. 质粒提取 BR2A101-01/02 — Plasmid Mini Kit | 质粒小提 BR2D102-01 — Endo-free Plasmid Maxi Kit | 质粒大提（无内毒素），回收率80%-90% # 三、基因表达分析（qPCR/qRT-PCR）全流程 ## 1. RNA提取 BR2B101 — Brizol Reagent | 总RNA提取试剂，有效抑制RNase ## 2. 基因组DNA去除与反转录 BR1D301 — Neoscript 1st cDNA Synthesis Premix (with gDNA Wiper) | 15min完成 BR1D303 — Neoscript All-in-One cDNA Synthesis Premix | 5min完成基因组清除和逆转录 ## 3. qPCR检测 BR1A501 — Robustart SYBR qPCR Premix (Universal ROX) | 特异性高，平台适用性广 BR1E102 — FastAmpli SYBR qPCR Premix (Universal ROX) | 荧光强度高，抗干扰能力强，兼容快速程序 BR1E103 — FastAmpli U+ SYBR qPCR Premix | 含UDG酶，防污染控制 BR1E201 — Robustart Probe qPCR Premix (Universal ROX) | 抗体修饰，灵敏度高高特异性 BR1E202 — FastAmpli Probe qPCR Premix (Universal ROX) | 适用于快速qPCR，扩增速率1kb/10s BR1E203 — FastAmpli U+ Probe qPCR Premix | 含UDG酶，防污染控制 BR1F103 — 4×Neoscript Fast SYBR qRT Premix (Universal ROX) | 省去逆转录操作 # 四、蛋白质分析（Western Blot）全流程 ## 1. 样品制备 BR4C101-104 — RIPA裂解液(强/中/弱/套装) | 裂解效率高，提取蛋白浓度优于竞品 BR4C121/122/123 — 蛋白酶/磷酸酶抑制剂混合物 | 有效防止蛋白降解和去磷酸化 BR4C131 — Cell Total Protein Extraction Kit | 高效提取细胞总蛋白 ## 2. 蛋白定量 BR4C201 — BCA蛋白定量试剂盒 | 线性关系R²≥0.99 BR4C202 — Bradford蛋白定量试剂盒 | 灵敏度高，去垢剂耐受性好 ## 3. 电泳 BR4C331-335 — One-Step PAGE Gel Fast Preparation Kit | 一步法灌胶，无需液封，操作快速 BR4C361 — 10×Tris-Glycine-SDS Running Buffer | 速溶型浓缩液 BR4C351 — 5×SDS-PAGE Protein Loading Buffer | 即用型上样缓冲液 BR4C303/304 — 预染蛋白Marker(180/250 kDa) | 条带准确清晰，兼容多种缓冲体系 ## 4. 转膜 BR4D421 — 10×Fast Transfer Buffer | 15-20min完成，可用乙醇替代甲醇 BR4D411-414 — PVDF膜/NC膜(0.22/0.45µm) ## 5. 封闭与孵育 BR4D441 — 5×Rapid Blocking Buffer | 10min快速封闭，无蛋白配方 BR4D451 — 10×TBST Buffer | 有效洗涤，降低非特异性背景 ## 6. 显色 BR4D602 — ECL Chemiluminescent Substrate Kit | 灵敏度pg级，发光信号稳定 BR4D601 — DAB Peroxidase Substrate Kit | 操作简单，显色背景干净 # 五、NGS建库与质控流程 BR3D201 — 通用DNA文库制备试剂盒 | 一体化反应，兼容性强 BR3N401系列 — NGS DNA Clean Beads | 回收率高且稳定，可完美替代主流产品 BR3M121系列 — 2×Super-Fidelity Master Mix | 保真性高，适用于长片段扩增 # 六、辅助与质控通用流程 ## 1. 核酸电泳 BP-10-50/BP-20-50/BP-15-50 — RNA Ladder(6000/1000/12000) | 条带清晰准确，分辨率高 BR1B202-01/02 — DNA Marker(2000/15000) | 室温稳定6个月 ## 2. 特殊RNA处理 BP-E12/BP-E13 — RNase H/RNase H II | 特异性水解DNA/RNA杂交链中的RNA BP-AS-18 — RNase A | 嘧啶特异性内切酶 ## 3. 胶回收/纯化 BR2A103 — Gel DNA Purification Kit BR3N401系列 — NGS DNA Clean Beads（通用型纯化磁珠）