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title: 案例1-BR3M121+PCR扩增
scene: 科研技术支持 · 客户问题解决案例
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owner: 王凡(浙江)/蒋嵘(广州)
updated: 2026-09
confidence: 中
source: 科研案例库-2026年9月.docx（科研技术支持整理，2026-09）
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# 案例1-BR3M121+PCR扩增

（浙江省人民医院+牟晓洲课题组）

**背景信息**：该课题组采购BR1D303、BR1E102和BR3M121，属老客户；

**存在问题**：长片段有时会扩增不出目的条带

解决过程

**客户问题**：20260818客户实验开展过程中，长片段大概3-4kb的，一直扩不出目的条带，其他的偶尔可以扩增，客户怀疑是高保真酶的问题。

**客户信息**：竞品：爱博泰克高保真酶系列；样本来源：培养的细胞提取RNA转录成的cDNA；片段长度：3.4kb；竞品试验结果：按照竞品说明书进行操作后，电泳结果无条带，改变退火温度，仍无条带。

**沟通过程**：线下和客户了解情况后，客户的逆转录试剂使用的是诺唯赞的R433属于qPCR逆转录试剂，对长片段的条带逆转录效果不好，扩增不出条带可能是因为逆转录的片段碎片化，导致长片段无法扩增。

**建议**：客户可以使用我司BR1D201长片段逆转录试剂逆转录；同时也重新验证下之前的RNA样本的质量。

**回访**：20260825客户测试我司BR1D201,使用BR3M121之前无法扩增的一些可以扩增出条带，但是3.4kb的片段，仍无法扩增，建议客户重新设计引物。20260908客户3.4kb片段仍未扩增，线下带教客户操作逆转录和PCR扩增使用我司BR1D201和BR3M121，在程序设置时采用梯度扩增，并且优化了延伸时间，按照5s/KB设置，共20s，后成功扩增。

![](原件/科研案例库-2026年9月_image1.png)

**成单情况及使用情况**：20260928：BR3M121客户已续购10ml。BR1D201客户有采购意愿。

**经验分析**：客户模板是cDNA且出现扩增不稳定的情况时，可考虑客户逆转录试剂是否合适，同时也要注意RNA的质量。扩增过程中可以采用梯度PCR摸索最适退火温度。


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*来源：科研案例库-2026年9月.docx ｜ 录入 2026-09-30 ｜ 置信度：中（技术支持整理，未经逐条复核）*