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 "文中货号": [
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 "逐页文本": [
  "5×FastAmpli RT Premix-UNG\n货号：M5144\n2024V01\n(Probe qRT-PCR)\n产品概述\nFastAmpli RT Premix-UNG (Probe qRT-PCR) 是荧光定量（TaqMan 探针法）RNA 扩增检测的专用试剂，含有经基因改造\n筛选得来的快速扩增的逆转录酶及DNA 聚合酶，能在20~40 min 内完成PCR 反应。本品具有较强的抑制物耐受性，具有更\n高的反转录和PCR 扩增效率，适合于低浓度RNA 模板的高灵敏度扩增，在较宽的定量区域内均能得到良好的标准曲线，准\n确进行定量。本试剂采用抗抑制扩增酶与UNG 酶的混合酶，以及含有dUTP 的优化Buffer 体系，不但能够实现含抑制物样\n品中目的基因的良好扩增，而且可以有效防止PCR 产物残留、气溶胶污染所带来的假阳性反应。本品与多数厂家的荧光定量\nPCR 仪兼容，如Applied Biosystems、Eppendorf、Bio-Rad 和Roche 等。\n试剂组成\n1. 10×FastAmpli RTase/UNG Mix\n2. 5×FastAmpli RT Premix Buffer (dUTP) (Mg\n2+ free) (DG)\n3. 25×MgCl2\n保存条件\n-20℃长期保存，4℃可保存3 个月。使用前应混匀，避免反复冻融。\nqRT-PCR 反应体系配制\n试剂\n25 µL 体系\n50 µL 体系\n终浓度\n5×FastAmpli RT Premix Buffer (dUTP) (Mg\n2+ free) (DG)\n5 µL\n10 µL\n1×\n10×FastAmpli RTase/UNG Mix\n2.5 µL\n5 µL\n1×\n25×MgCl2\n1 µL\n2 µL\n1×\n25×Primer-Probe Mix\n1,2\n1 µL\n2 µL\n1×\nTemplate RNA\n3\n——\n——\n——\nddH2O\nTo 25 µL\nTo 50 µL\n——\n1. 使用普通PCR 程序扩增时，通常引物终浓度为0.2 μM 可以得到较好结果；反应性能较差时，可以在0.2～1 μM 范围内调\n整引物浓度。通常探针浓度在0.1～0.3 μM 范围内优化。可进行浓度梯度的实验，寻找引物和探针的最佳组合。\n2. 使用快速PCR 程序扩增时，适当提高引物探针浓度有可能获得更好的扩增结果，引物探针比例应进行配比优化。\n3. 不同种类的模板中含有的靶基因的拷贝数不同，必要时可进行梯度稀释，确定最佳的模板添加量。\n反应条件\n普通PCR 程序\n快速PCR 程序\n步骤\n温度\n时长\n循环数\n步骤\n温度\n时长\n循环数\n逆转录\n50℃\n10~20 min\n1\n逆转录\n50℃\n5 min\n1\n变性\n95℃\n1~5 min\n1\n变性\n95℃\n30 s\n1\n变性\n95℃\n10~20 s\n40~50\n变性\n95℃\n1~3 s\n40~45\n退火延伸\n56~64℃\n20~60 s\n退火延伸\n56~64℃\n3~20 s\n*本品所含温敏型TS-UNG 酶在室温下即可发挥功能，在逆转录过程失活。\n质量控制\n",
  "5×FastAmpli RT Premix-UNG\n货号：M5144\n2024V01\n(Probe qRT-PCR)\n1. 功能检测：qRT-PCR 的敏感性、特异性、可重复性。\n2. 无外源核酸酶活性，无外源内切、外切核酸酶污染。\n技术说明\n1. 本品所含快速DNA 聚合酶的扩增速率不低于1 kb/10 s。不同快速PCR 仪其升降温速、控温模式、导热效率差异较大，建\n议结合具体快速PCR 仪，进行其最适反应条件的优化。\n2. 逆转录时间根据待扩增片段的长度进行优化，较长片段可适当延长逆转录时间。\n3. 退火延伸温度应根据引物探针的Tm 值和反应的实际情况进行优化。\n4. 对于退火温度较低的引物或超过200 bp 长片段扩增建议采用三步法。\n5. 不同待扩增基因对dUTP 的利用效率和对UNG 酶的敏感度不同，因此，如果采用UNG 体系导致检测灵敏度下降，应对反\n应体系进行调整优化，如需技术支持请与我公司联系。\n6. 扩增前后请使用专用的区域和移液器，戴手套操作并经常更换；PCR 反应完成后切勿打开反应管，以最大限度地减少PCR\n产物对样品的污染。\n"
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 "官网品名": "5×FastAmpli RT Premix-UNG (Probe qRT-PCR) 【多重快速qRT-PCR 】",
 "详情页": "https://www.biori.com/product/44649",
 "说明书URL": "https://qipeima.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/uploads/qipeima/299/05aa6382/24/09/e0956a0b96a26315c2b9329558950952f6bf9964.pdf",
 "说明书文件名": "M5144 说明书",
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