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   "原文": "2. 若用于qPCR/qRT-PCR，则需加入荧光探针到反应体系中。通常引物终浓度为0.2 μM 可以得到较好结果；反应性能较差"
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   "原文": "56~72℃"
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 "文中货号": [
  "E15"
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 "逐页文本": [
  "Robustart Taq HD\n货号：E15\n2023V01\n产品概述\nRobustart Taq HD 是经过基因改造筛选而来的高特异性重组DNA 聚合酶，可以催化5’至3’方向严格依赖于DNA 模板和\n碱基配对原则的高特异性的扩增反应。本品是通过大肠杆菌重组表达、多步分离纯化后获得高纯度酶蛋白，然后进行热启动\n修饰得到常温下封闭活性的热启动酶。本品适合用于特异性要求更高的突变位点检测，尤其适合于ARMS PCR 荧光定量检测。\n规格\n5 U/µL\n试剂组成\n1．5 U/µL Robustart Taq HD\n2．10×HD Buffer Ⅲ(dNTP free, Mg\n2+ free)（选配）\n3．25 mM MgCl2（选配）\n活性定义\n在74℃、30 min 内，以活性化的大马哈鱼精子DNA 作为模板/引物，将10 nmol 脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需要的酶\n量为1 个活性单位（U）。\n储存缓冲液\n20 mM Tris-HCl (pH 8.0)，100 mM KCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，Stabilizer，50% Glycerol。\n保存条件\n-20℃长期保存，使用前应混匀，避免反复冻融。\n质量控制\n1. SDS-PAGE 电泳纯度大于98%。\n2. 扩增灵敏度、批间差异、稳定性。\n3. 无外源核酸酶活性，无外源内切、外切核酸酶污染。\nPCR 反应体系配制\nComponent\nVolume per Reaction\nConcentration in Master Mix\n10×HD Buffer Ⅲ(dNTP free, Mg\n2+ free)\n1\n5 µL\n1×\ndNTPs（10 mM each dNTP）\n0.5~1 µL\n100~200 µM\n25 mM MgCl2\n2~8 µL\n1~4 mM\n5 U/µL Robustart Taq HD\n0.25~0.5 µL\n1.25~2.5 U\n25×Primer Mix\n2\n2 µL\n1×\nTemplate\n——\n< 1 µg/reaction\nddH2O\nTo 50 µL\n——\n",
  "Robustart Taq HD\n货号：E15\n2023V01\n1. 对于不含Mg\n2+的Buffer，必须同时加入MgCl2 使用。\n2. 若用于qPCR/qRT-PCR，则需加入荧光探针到反应体系中。通常引物终浓度为0.2 μM 可以得到较好结果；反应性能较差\n时，可以在0.2～1 μM 范围内调整引物浓度。通常探针浓度在0.1～0.3 μM 范围内优化。可进行浓度梯度的实验，寻找引物\n和探针的最佳组合。\n反应条件\n两步法\n三步法\n步骤\n温度\n时长\n循环数\n步骤\n温度\n时长\n循环数\n热启动\n95℃\n1~5 min\n1\n热启动\n95℃\n1~5 min\n1\n变性\n95℃\n10~20 s\n35~50\n变性\n95℃\n10~20 s\n35~50\n退火延伸\n56~64℃\n20~60 s\n退火延伸\n56~72℃\n10~60 s\n技术说明\n1. 特别适合于ARMS PCR 荧光定量检测。\n2. 适用于普通PCR、荧光定量PCR 检测。\n3. 具有5’-3’聚合酶，5’-3’外切核酸酶活性；无3’-5’外切酶活性，无校对功能。\n4. PCR 产物3’端为A，产物可直接进行T 载体克隆。\n"
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 "官网品名": "Robustart Taq HD  3‘ 末端高分辨酶【DNA聚合酶 】",
 "详情页": "https://www.biori.com/product/44674",
 "说明书URL": "https://qipeima.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/uploads/qipeima/299/05aa6382/24/09/2b7187cc6793872d871405c59a518b20248c16a2.pdf",
 "说明书文件名": "E15 说明书",
 "PDF字节": 1808685
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