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 "文中货号": [
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 "逐页文本": [
  "Hyperstart Tth\n货号：E10\n2024V01\n产品概述\nHyperstart Tth 是我公司开发的热启动Tth 酶，既具有5’-3’依赖于DNA 模板的聚合酶活性，可广泛应用于各种PCR 反\n应；又在Mn\n2+存在下，具有更高的高温反转录活性，能够有效消除RNA 高级结构和低温条件下引物非特异性退火对cDNA\n合成的不利影响，从而增加了反转录的特异性，提高了扩增的效率和产量，可以用来进行单酶一步法RT-PCR 反应。Hyperstart\nTth 在常温下活性被封闭，特异性更好，能够显著增强低浓度模板的扩增效果。\n规格\n5 U/µL\n试剂组成\n1．5 U/µL Hyperstart Tth\n2．10×Tth RT Buffer Basic (Mn\n2+ free)（选配）\n3．25 mM Mn(OAc)2（选配）\n*10×Tth RT Buffer Basic (Mn\n2+ free)不含dNTP 和Mn\n2+，配制反应体系时请加入dNTPs 和Mn(OAc)2 使用。\n活性定义\n在70℃、30 min 内，将10 nmol dNTPs 掺入到酸不溶性DNA 中所需的酶量为1 个活性单位（U）。\n保存条件\n-20℃长期保存，使用前应混匀，避免反复冻融。\n质量控制\n1. SDS-PAGE 电泳纯度大于98%。\n2. 扩增灵敏度、批间差异、稳定性。\n3. 无外源核酸酶活性，无外源内切、外切核酸酶污染。\nPCR 反应体系配制\nComponent\nVolume per Reaction\nConcentration in Master Mix\n10×Tth RT Buffer Basic (Mn\n2+ free)\n1\n5 µL\n1×\ndNTPs（10 mM each dNTP）\n1.5 µL\n300 µM\n25 mM Mn(OAc)2\n2~6 µL\n1~3 mM\n5 U/µL Hyperstart Tth\n1~2 µL\n5~10 U\n25×Primer Mix\n2\n2 µL\n1×\nTemplate\n——\n——\nddH2O\nTo 50 µL\n——\n1. 该Buffer 不含dNTP 和Mn\n2+，必须补充加入dNTPs 和Mn(OAc)2使用。\n2. 若用于qPCR/qRT-PCR，则需加入荧光探针到反应体系中。通常引物终浓度为0.2 μM 可以得到较好结果；反应性能较差\n时，可以在0.2～1 μM 范围内调整引物浓度。通常探针浓度在0.1～0.3 μM 范围内优化。可进行浓度梯度的实验，寻找引物\n和探针的最佳组合。\n",
  "Hyperstart Tth\n货号：E10\n2024V01\n反应条件\n技术说明\n1. 具有5’-3’聚合酶，5’-3’外切核酸酶活性；无3’-5’外切酶活性；PCR 产物3’端为A。\n2. Hyperstart Tth 常用的反转录温度为60℃，可以根据扩增反应的特征不同在60℃~70℃进行优化；反转录时间可以在\n15~30 min 进行优化。\n3. 更适合用于特异性引物进行RT 反应，并且引物Tm值应为60℃或更高温度；不推荐采用Oligo(dT)18-20或Random Primers\n等Tm 值过低的引物。\n4. 有利于解决RNA 复杂二级结构带来的反转录效率降低的问题；有助于提高引物与模板杂交的特异性；适用于双重或多重单\n酶一步法RT-PCR 反应。\n5. 与M-MLV 相比具有更高的热稳定性；与Taq 相比，对各类PCR 抑制物具有更高的耐受性。\n6. 由于采用Mn\n2+进行扩增，本体系保真度有所降低，因此不适合于保真度要求较高的克隆、测序等实验。\n7. 对于退火温度较低的引物或超过200 bp 长片段扩增建议采用三步法。\n普通PCR\n一步法RT-PCR\n步骤\n温度\n时长\n循环数\n步骤\n温度\n时长\n循环数\n热启动\n95℃\n1~5 min\n1\n变性\n90℃\n30 s\n1\n变性\n95℃\n10~20 s\n35~50\n逆转录\n60℃\n25 min\n1\n变性\n95℃\n1~5 min\n1\n退火延伸\n56~64℃\n20~60 s\n变性\n95℃\n10~20 s\n35~50\n退火延伸\n56~64℃\n20~60 s\n"
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 "官网品名": "Hyperstart®  Tth【Tth双功能酶 】",
 "详情页": "https://www.biori.com/product/44588",
 "说明书URL": "https://qipeima.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/uploads/qipeima/299/05aa6382/24/09/464d264f0b7d973dcb4b983e7ad5fd57f34f15b2.pdf",
 "说明书文件名": "E10 说明书",
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