{
 "页数": 6,
 "全文字符数": 5851,
 "体系配置候选": [
  {
   "页": 3,
   "原文": "中，轻柔混匀，即得到配制好的检测抗体工作液。根据实验操作，建议实际配制体积比理论用量多5-20%，检测抗体工作液"
  },
  {
   "页": 5,
   "原文": "请在试剂盒标识的有效期内使用产品，各组分按标签条件储存。不同批号的试剂组分不可混用。本试剂盒不可与其他商"
  },
  {
   "页": 5,
   "原文": "所有组分在使用前需平衡至室温，液体试剂充分混匀后再取样。预制酶标板为可拆卸板条，可根据实验需求拆取。剩余"
  }
 ],
 "反应程序候选": [
  {
   "页": 2,
   "原文": "剩余的酶标板条，及时封口并放置2-8℃冰箱"
  },
  {
   "页": 2,
   "原文": "使用前可放置37℃直至结晶完全溶解。用新鲜"
  },
  {
   "页": 3,
   "原文": "未拆封产品放置2-8℃保存，有效期为12 个月。拆封后酶标板放置2-8℃保存，有效期为1 个月。"
  },
  {
   "页": 3,
   "原文": "试剂盒中物料使用结束后需及时放回2-8℃储存条件下保存。"
  },
  {
   "页": 3,
   "原文": "将试剂盒放至室温（25±3℃）至少平衡20 min。"
  },
  {
   "页": 3,
   "原文": "若浓缩洗液（20×）出现结晶，37℃温育直至结晶全部溶解。"
  },
  {
   "页": 3,
   "原文": "取出实验所需酶标板条，剩余酶标板条放置铝箔袋中封口，立即放置2-8℃保存。"
  },
  {
   "页": 4,
   "原文": "加入100 μL STD1-STD8 CHO HCP 校准品、稀释好的样本（包括加标样本）。封板膜封板，保持室温（25±3℃）在微孔板"
  },
  {
   "页": 4,
   "原文": "振荡器上孵育120min，微孔板振荡器速度保持在550 rpm。"
  },
  {
   "页": 4,
   "原文": "将适量显色液倒入加样槽中，立即用多通道移液器每孔分别加入100 μL 显色液，保持室温（25±3℃）避光静置显色15 min。"
  },
  {
   "页": 4,
   "原文": "将适量终止液倒入加样槽中，每孔加入50 μL 终止液，静置3min 后用酶标仪进行读数。"
  },
  {
   "页": 4,
   "原文": "请在反应终止后15 min 内进行数据读取，否则会影响结果的准确性。"
  },
  {
   "页": 5,
   "原文": "30 min 再使用"
  }
 ],
 "文中货号": [
  "C035",
  "DG44",
  "OD450",
  "V01"
 ],
 "逐页文本": [
  "CHO 宿主蛋白残留检测试剂盒\n（酶联免疫吸附法·一步法）\n货号：BP-QP-C035\nV01\n1 / 6\n产品名称\nCHO 宿主蛋白残留检测试剂盒（酶联免疫吸附法·一步法）\n包装规格\n\n32 T/盒\n\n96 T/盒\n预期用途\nCHO 宿主蛋白残留检测试剂盒（酶联免疫吸附法·一步法）适用于中国仓鼠卵巢细胞( CHO )进行表达的生物制品中宿主细胞蛋\n白（Host Cell Protein，HCP）定量检测，如重组蛋白、抗体药物、疫苗等生物制品。本试剂盒可对纯化中间品、原液及制剂\n中HCP 残留进行定量检测，可用于工艺优化、过程监测与产品放行。本产品属于通用型试剂盒，不限定具体纯化工艺，可广\n泛识别和检测产品中CHO-K1、CHO-DG44、CHOZN 等细胞株来源的HCP。\n本试剂盒仅供研究使用，不可用于医学诊断。\n检验原理\n本试剂盒基于酶联免疫吸附法（Enzyme-linked Immunosorbent Aassy, ELISA）检测原理，采用双抗体夹心法测定样品中的\nCHO HCP 含量。该检测体系用针对CHO HCP 的多克隆抗体作为捕获抗体，预先包被于96 微孔板表面，加入校准品或待测样\n品和辣根过氧化物酶（HorseradishPeroxidase, HRP）标记的酶标检测抗体，形成“捕获抗体-HCP 抗原-酶标检测抗体”的\n夹心免疫复合物。经洗涤后，加入显色液（3,3',5,5'-四甲基联苯胺, TMB）显色，TMB 在HRP 的催化下由无色转化成蓝色并\n在酸的作用下最终转化成黄色，产生的吸光度信号（检测主波长：450 nm；参比波长620 nm～650 nm）与HCP 含量在一\n定范围内呈正相关，通过建立HCP 校准品浓度与吸光度之间的标准曲线，采用四参数拟合模型（4-Parameter Logistic, 4PL)\n计算待测样品中宿主蛋白残留水平。\n该方法利用抗体和抗原之间的高度特异性识别特性，实现对CHO 来源复杂HCP 的高灵敏度检测。本试剂盒所用多克隆抗体经\n过质谱覆盖率验证（Antibody Affinity Extraction-Mass Spectrometry，AAE-MS），结果表明该抗体可识别绝大多数HCP。\n首次使用本试剂盒时建议先做样品的适用性验证，确定合适的样本稀释方案，同时确认样品基质不会对试剂盒体系造成检测干\n扰。\n图1 检测原理示意图\n",
  "CHO 宿主蛋白残留检测试剂盒\n（酶联免疫吸附法·一步法）\n货号：BP-QP-C035\nV01\n2 / 6\n产品性能\n1.\n本试剂盒经充分评估，标曲范围为1.56-100 ng/mL。\n2.\n检测限为零校准品均值加上三倍标准偏差所对应的浓度，本试剂盒检测限约为0.5 ng/mL。\n3.\n定量限为零校准品均值加上十倍标准偏差所对应的浓度，本试剂盒定量限约为1.0 ng/mL。\n4.\n板内精密度≤10%，板间精密度≤15%。\n5.\n专属性：与毕赤酵母、MDCK、Sf9、293、E.coli HCP 均无交叉反应。\n主要组成成分\n表1 ELISA 试剂盒主要组成成分\n组分\n32T 规格\n96T 规格\n产品号\n说明\n储存温度\nCHO HCP 校准品\n500 μL/管×8\n1000 μL/管×8\nBPA-003\n产品为玫红色液体溶液，一共8 管，浓度分别\n为：0，1.56，3.125，6.25，12.5，25，50，\n100 ng/mL，产品信息详见标签。\n2-8°C\n抗CHO HCP\n预包被酶标板\n32 孔\n96 孔\nBPB-003\n已包被适量的CHO HCP 捕获抗体，放置于抽\n真空的铝箔袋中，含两枚干燥片。使用后若有\n剩余的酶标板条，及时封口并放置2-8℃冰箱\n保存。请勿长时间放置室温。\nCHO HCP\n检测抗体（100×）\n40μL×1 管\n120μL×1 管\nBPC-003\n产品为青色液体溶液，是HRP 标记后的多克\n隆抗体，需稀释100 倍使用，应避光保存。\n显色液\n4 mL×1 瓶\n12 mL×1 瓶\nBPD-001\n产品为无色液体溶液，如发现溶液变蓝色，请\n勿使用。使用前需在室温平衡20 分钟以上，\n应避光保存。\n终止液\n3 mL×1 瓶\n6 mL×1 瓶\nBPE-001\n产品为酸性溶液，操作过程做好通风，避免接\n触皮肤、眼睛及衣物。\n试剂稀释液\n25 mL×1 瓶\n50 mL×1 瓶\nBPF-002\n产品为玫红色液体溶液，用于检测抗体和样本\n的稀释，初次检测的样本需摸索确认最佳稀释\n倍数。\n浓缩洗液（20×）\n25 mL×1 瓶\n50 mL ×1 瓶\nBPG-001\n产品为蓝色液体溶液，低温时容易结晶析出，\n使用前可放置37℃直至结晶完全溶解。用新鲜\n制备的超纯水稀释20 倍使用，用于酶标板样\n品孵育后洗涤。\n封板膜\n1 张\n2 张\nBPI-001\n用于样品孵育反应时密封覆盖酶标板条，防止\n污染和溶液挥发。\n说明书\n1 份\n1 份\n/\n用于指导客户进行实验室操作\n",
  "CHO 宿主蛋白残留检测试剂盒\n（酶联免疫吸附法·一步法）\n货号：BP-QP-C035\nV01\n3 / 6\n未提供但需准备\n\n涡旋振荡器\n\n洗板机\n\n微孔板振荡器\n\n酶标仪\n\n去离子水\n\n微量移液器与配套灭菌枪头\n\n吸水纸等耗材\n储存条件及有效期\n1.\n未拆封产品放置2-8℃保存，有效期为12 个月。拆封后酶标板放置2-8℃保存，有效期为1 个月。\n2.\n酶标板拆封使用后，剩余部分应放于铝箔袋中密封保存。\n3.\n试剂盒中物料使用结束后需及时放回2-8℃储存条件下保存。\n4.\n产品批号及有效期见产品包装标签。\n实验流程\n图2 操作流程示意图\n检测方法\n一、实验前准备\n1.\n将试剂盒放至室温（25±3℃）至少平衡20 min。\n2.\n若浓缩洗液（20×）出现结晶，37℃温育直至结晶全部溶解。\n3.\n取出实验所需酶标板条，剩余酶标板条放置铝箔袋中封口，立即放置2-8℃保存。\n二、试剂配制\n1.\n洗涤工作液配制\n确认浓缩洗液（20×）无结晶，按浓缩洗液（20×）：超纯水=1：19 体积比进行稀释配制，例如15 mL 浓缩洗液（20×）\n加入285 mL 新鲜配制的超纯水混匀，必须精确量取配制。稀释后的溶液即为洗涤工作液，用于酶标板洗板。\n2.\n检测抗体工作液配制\n将CHO HCP 检测抗体（100×）用试剂稀释液稀释100 倍，例如25μL CHO HCP 检测抗体（100×）加入2475μL 稀释液\n中，轻柔混匀，即得到配制好的检测抗体工作液。根据实验操作，建议实际配制体积比理论用量多5-20%，检测抗体工作液\n需现配现用。\n",
  "CHO 宿主蛋白残留检测试剂盒\n（酶联免疫吸附法·一步法）\n货号：BP-QP-C035\nV01\n4 / 6\n3.\n样本稀释\n\n初次测试的样本需进行梯度稀释摸索，确定最小稀释倍数。若您的样本为过程工艺样本，其浓度高于本检测方法的分析\n范围，可高于最小稀释倍数进行稀释，但应评估其稀释线性，以确保检测方法准确。建议对样本进行加标回收研究，以\n确定无样品基质的干扰，确保HCP 残留检测结果的准确性和可靠性。如原液样本有轻微基质干扰，可通过适当稀释去除\n基质干扰。\n\n若不是初次使用本试剂盒，可按照验证过的稀释方案和加标方案对样本进行HCP 残留检测。\n三、检测步骤\n1.\n酶标板孔排列\n根据实验量从铝箔袋中取出抗CHO HCP 抗体包被酶标板相应数量板条。\n2.\n加入检测抗体工作液\n将稀释好的检测抗体工作液轻微混匀，倒入加样槽中，用多通道移液器加入100μL/孔检测抗体工作液，注意勿引入气泡。注\n意多通道移液器加液精度，如多通道移液器枪头中液面出现肉眼可见不齐，需重新吸取或者更换多通道移液器。\n3.\n加入校准品/样本\n加入100 μL STD1-STD8 CHO HCP 校准品、稀释好的样本（包括加标样本）。封板膜封板，保持室温（25±3℃）在微孔板\n振荡器上孵育120min，微孔板振荡器速度保持在550 rpm。\n\n请务必保证校准品、阴性对照、样本和检测抗体的加样在10 分钟内连续进行。\n\n不同品牌振荡器可能在同一转速下震荡频率不一致，可根据不同振荡器调节转速，保证每孔溶液充分混匀且不洒出即可。\n4.\n洗涤\n孵育完成后，弃去各孔内液体，每孔分别加入300 μL 洗涤工作液，静置10 秒后弃去孔内液体；继续重复以上操作4 次，洗\n板结束在吸水纸上轻轻拍干。\n5.\n显色\n将适量显色液倒入加样槽中，立即用多通道移液器每孔分别加入100 μL 显色液，保持室温（25±3℃）避光静置显色15 min。\n注意显色步骤请勿振荡，否则会造成本底升高，检测精密度变差。\n6.\n终止\n将适量终止液倒入加样槽中，每孔加入50 μL 终止液，静置3min 后用酶标仪进行读数。\n\n请注意终止液加样顺序需和显色液加样顺序保持一致，以保证孔间显色时间的一致性。\n7.\n数据读取\n选择酶标仪主波长450 nm，参考波长630 nm，测定各孔450 nm 及630 nm 吸光值。\n\n请在反应终止后15 min 内进行数据读取，否则会影响结果的准确性。\n四、结果分析\n1.\n各孔OD 值=450 nm 吸光值-630 nm 吸光值，若酶标仪没有配备参考波长（630 nm），只测OD 值=450 nm 吸光值，\n则每个校准品和样本的OD 值应减去空白孔的OD 值。若待测样品浓度的OD 值超出标准曲线最高值，宜对样品做进一步稀释\n后再检测。\n2.\n本试剂盒建议以校准品浓度作为横坐标，OD 值为纵坐标，采用四参数方式进行曲线拟合，标曲的拟合软件可以用酶标仪\n自带的软件，若无，则建议采用专业的标曲制作软件，如Curve Expert，ELISACalc 等。标准曲线相关系数R\n2≥0.99，否则\n实验无效。\n3.\n校准曲线建议设置2-3 复孔，应先计算其平均值再进行曲线拟合。\n4.\n将待测样品测定的OD 值代入校准曲线的拟合方程中，计算出样品浓度，即为待测样品中CHO HCP 浓度。如待测样品有\n被稀释，计算结果时应乘以稀释倍数。若有对样品进行加标测试，则加标回收率应符合相应法规的方法学验证要求。\n5.\n一种典型的校准曲线如下，数据仅作参考，具体以实际测试为准：\n",
  "CHO 宿主蛋白残留检测试剂盒\n（酶联免疫吸附法·一步法）\n货号：BP-QP-C035\nV01\n5 / 6\n注意事项\n1.\n本试剂盒仅供研究使用。\n2.\n所有的样本和试剂理被认为具有潜在危害。为了您的安全和健康，请穿戴实验服与一次性手套等防护措施。避免试剂直\n接接触皮肤和眼睛。如不慎接触，请立即用大量清水清洗。\n3.\n使用本试剂盒前，请详细阅读产品说明书。\n4.\n请在试剂盒标识的有效期内使用产品，各组分按标签条件储存。不同批号的试剂组分不可混用。本试剂盒不可与其他商\n品化试剂盒混用。\n5.\n为避免微生物的污染，以及试剂与样本间的交叉污染，请使用一次性枪头，请使用干净的容器、加样槽配制和暂存试剂，\n封板膜不可重复使用。\n6.\n所有组分在使用前需平衡至室温，液体试剂充分混匀后再取样。预制酶标板为可拆卸板条，可根据实验需求拆取。剩余\n未用部分请及时放回含干燥剂的铝箔袋中，密封低温保存。宜避免对酶标板底部刮花或其他影响光密度测量的操作。\n7.\n洗板推荐使用洗板机，洗板过程中避免串流或气泡，以防影响实验结果准确性。最后一次洗板后，应将板孔中残留的液\n体轻轻拍干。\n8.\n每次测定时，需生成新的标准曲线。\n9.\n不同批次的试剂盒不建议混用。\n10. 酶标板洗板完成后请立即加显色液，勿让酶标板长时间处于干燥状态。\n常见异常排查\n异常现象\n可能原因\n解决思路\n实验OD 值整体偏低\n试剂盒未平衡完全\n实验前将试剂盒从冰箱拿出，室温平衡至少\n30 min 再使用\n试剂混用或保存不当\n不同批次试剂不可混用；各试剂请按说明书\n指导温度存放\n孵育时间/温度和说明书不一致\n请严格按照说明书要求进行孵育。冬天室温\n较低时，如显色较浅，可适当延长显色时间\n或注意调整室温至25°C 左右。\n样本制备不合适\n重新制备标曲和样本\n实验OD 值整体偏高\n孵育时间/温度和说明书不一致\n请严格按照说明书要求进行孵育反应\n样本制备不合适\n重新制备标曲和样本\n标曲正常，样本显色异常\n样本稀释倍数不合适\n建议对初测样品做4-5 个稀释梯度，确保至\n少有一个值可以落在检测范围\nSTD（ng/mL）\nMean-OD450-630nm\n100\n2.981\n50\n1.636\n25\n0.928\n12.5\n0.506\n6.25\n0.311\n3.125\n0.202\n1.56\n0.141\n0\n0.099\nR\n2\n0.9999\n",
  "CHO 宿主蛋白残留检测试剂盒\n（酶联免疫吸附法·一步法）\n货号：BP-QP-C035\nV01\n6 / 6\n钩状效应\n在确保检测浓度落在检测范围内的前提下，\n提高稀释倍数\n样本保存不当或反复冻融次数过多\n尽量使用分装冻存不超过3 个月的样本；分\n装使用，减少反复冻融次数\n样本原液中存在干扰因素\n在确保检测浓度落在检测范围内的前提下，\n提高稀释倍数，减轻干扰影响；无法解决时，\n联系我司技术人员进行专项调整\n样本中待测物含量过低\n降低稀释倍数或浓缩样本后再加样\n背景值高\n孵育时间/温度和说明书不一致\n请严格按照说明书要求进行孵育反应\n微孔板反应前未覆盖封板膜\n孵育时应覆盖封板膜，防止液体蒸发和杂物\n污染\n洗涤或加样操作过程异常，不慎带入污染\n使用试剂盒自带洗液，确保洗涤次数和洗液\n体积充分，洗涤后孔内干净无残留；确保实\n验操作区域的环境洁净\n显色未避光/时间长\n显色时应避光，显色时间参考说明书\n变异系数（CV）较大\n移液器不准\n使用校准后的移液器并正确操作\n边缘效应\n确保所有试剂和酶标板均为同一温度\n试剂混用\n不同批次试剂不可混用\n加标回收率超出限定范围\n基质干扰\n通过线性稀释和回收率实验评估基质效应。\n在确保检测浓度落在检测范围内的前提下，\n提高稀释倍数，减轻干扰影响；无法解决时，\n联系我司技术人员进行专项调整\n加标浓度选取不合适\n加标浓度的设定最好大于实际样品中目标分\n析物的浓度；低浓度下加标浓度的选择，不\n宜小于定量限\n"
 ],
 "官网品名": "CHO宿主蛋白残留检测试剂盒（酶联免疫吸附法 · 一步法）【宿主细胞残留蛋白检测 】",
 "详情页": "https://www.biori.com/product/44739",
 "说明书URL": "http://qipeima.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/pd/d/1/b/d1be2bb01aaec9500d1970df4e09c958.pdf",
 "说明书文件名": "BP-QP-C035 说明书",
 "PDF字节": 891432
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