{
 "页数": 4,
 "全文字符数": 4184,
 "体系配置候选": [
  {
   "页": 1,
   "原文": "试剂盒中含有如下组分："
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   "页": 1,
   "原文": "试剂盒组分"
  },
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   "页": 1,
   "原文": "不同批号试剂盒中各组分不可以互换。"
  },
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   "页": 2,
   "原文": "单孔RNA 反应体系=18μL BV RNA PCR Buffer+2μL BV RNA Enzyme MIX，配制RNA 扩增试剂总量为N+2 孔"
  },
  {
   "页": 2,
   "原文": "（含2 孔损失量），根据计算的检测数量配制RNA 反应体系，将相应数量的RNA 反应体系，按照每孔20 μL 的量"
  },
  {
   "页": 2,
   "原文": "4.1 按照20µL/管分装量将分别将BV RNA 反应体系和BV DNA PCR MIX 分装至反应管后，按下列表格分别加入无"
  },
  {
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   "原文": "RNA 组分"
  },
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   "原文": "单孔用量（µL）"
  },
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   "原文": "DNA 组分"
  },
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   "页": 2,
   "原文": "单孔用量（µL）"
  },
  {
   "页": 2,
   "原文": "BV RNA 反应体系"
  },
  {
   "页": 3,
   "原文": "荧光通道选择FAM、VIC、CY5、ROX，其中FAM、VIC（DNA 反应体系无此通道，无需关注该通道检测结果）、"
  },
  {
   "页": 3,
   "原文": "CY5 为靶标基因，ROX 为内标基因。若仪器为ABI 系列时，参比荧光选择none，DNA 反应体系无需选择VIC 通道。"
  },
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   "页": 3,
   "原文": "DNA 反应体系检测目标"
  },
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   "原文": "RNA 反应体系检测目标"
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   "原文": "4、不要使用过期组分或者不同批次组分混合使用。"
  },
  {
   "页": 4,
   "原文": "8、样品、校准品等在使用后及时封盖，避免组分间及气溶胶等的污染造成假阳性。"
  }
 ],
 "反应程序候选": [
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   "页": 1,
   "原文": "1、试剂盒于≤-20℃避光储存，有效期为24 个月。"
  },
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   "页": 2,
   "原文": "紫外照射30min 后，用75%酒精喷洒并擦干。"
  },
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   "原文": "25℃：2 分钟"
  },
  {
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   "原文": "50℃：15 分钟"
  },
  {
   "页": 3,
   "原文": "95℃：3 分钟"
  },
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   "原文": "95℃：10 秒，60℃（采集荧光）：30 秒"
  },
  {
   "页": 4,
   "原文": "1、试剂盒应在-20℃以下保存。"
  }
 ],
 "文中货号": [
  "ABI7500",
  "QN32-50"
 ],
 "逐页文本": [
  "版本：02 版\n1 / 4\n【产品名称】\n牛源病毒（BVDV/REO-3/BPIV-3/BPV-3/BAV-3）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）\n货号：BP-QN32-50\n【包装规格】\n50 Reactions/盒\n【预期用途】\n本试剂盒用于定性检测动物源性原辅料、细胞库、病毒种子库、未加工收获液和最终产品等各种生物材料中是\n否有5 种牛源性病毒污染。\n牛源病毒名称\n缩写\n英文全称\n牛病毒性腹泻病毒\nBVDV\nBovine Viral Diarrhea Virus\n呼肠孤病毒3 型\nREO-3\nReovirus 3\n牛副流感病毒3 型\nBPIV-3\nBovine Parainfluenza 3 Virus\n牛细小病毒3 型\nBPV-3\nBovine Parvovirus 3\n牛腺病毒3 型\nBAV-3\nBovine Adenovirus type 3\n【产品简介】\n本试剂盒利用PCR-荧光探针法，针对5 种牛源性病毒序列保守区域设计特异性引物探针。具有操作简便，检\n测快速，特异性强，灵敏度高的特点。\n内标（IC）可在样品提取阶段加入，以评估提取效果；也可在PCR 扩增反应阶段加入，以监控扩增反应是否存\n在抑制，防止假阴性结果的产生。本试剂盒含有UDG 酶，用于预防扩增产物的污染。\n本试剂盒与珠海横琴宝锐核酸提取或纯化试剂盒Ⅰ（磁珠法）配套使用，高效提取样品中的5 种牛源性病毒核\n酸，检测限可达到1copy/μL。\n【主要成分与含量】\n试剂盒中含有如下组分：\n试剂盒组分\n规格（50 Reactions/盒）\nBV RNA PCR Buffer\n0.9mL×1 管\nBV RNA Enzyme MIX\n0.1mL×1 管\nBV DNA PCR MIX\n1.0mL×1 管\nBV 阳性对照\n1.5mL×2 管\nBV 阴性对照\n1.5mL×2 管\nBV 内标\n0.5mL×1 管\n说明书\n1 份\n说明：\n不同批号试剂盒中各组分不可以互换。\n实验操作中需要但试剂盒中未提供的试剂：核酸提取或纯化试剂盒。\n【储存条件及有效期】\n1、试剂盒于≤-20℃避光储存，有效期为24 个月。\n",
  "版本：02 版\n2 / 4\n2、试剂盒避免反复冻融，冻融次数不宜超过7 次。\n3、产品批号及有效期：见产品外包装。\n【适用机型】\n包括但不限于以下机型：SLAN-96P、SLAN-96S 全自动医用PCR 分析系统；ABI7500、ABl QuantStudio™5\n实时荧光定量PCR 仪；Roche LightCycler 480 荧光定量PCR 仪；伯乐CFX96 定量PCR 仪。\n【相关设备】\n超净工作台或生物安全柜、掌上离心机、涡旋混匀仪、荧光定量PCR 仪、不同规格的移液器。\n【检验方法】\n1. 实验前准备\n注意实验环境的控制，建议尽量在超净工作台或生物安全柜中进行实验操作，工作台面、移液枪及离心管架用\n紫外照射30min 后，用75%酒精喷洒并擦干。\n2. 试剂准备\n从试剂盒中取出BV RNA PCR Buffer、BV RNA Enzyme MIX、BV DNA PCR MIX、BV 内标、BV 阴性对照、BV\n阳性对照，置于室温融化，充分震荡混匀后瞬时离心备用。\n2.1 RNA 检测试剂的准备\n根据所要检测样品的数量，每个样品做2 个重复孔，计算所需反应孔数N=（样品数+1 个无模板对照NTC+1\n个阴性对照NCS+1 个阳性对照PC+1 个阳性对照样本PCS）×2。\n单孔RNA 反应体系=18μL BV RNA PCR Buffer+2μL BV RNA Enzyme MIX，配制RNA 扩增试剂总量为N+2 孔\n（含2 孔损失量），根据计算的检测数量配制RNA 反应体系，将相应数量的RNA 反应体系，按照每孔20 μL 的量\n分装至96 孔PCR 板或者PCR 八连管中。\n2.2 DNA 检测试剂的准备\n根据计算的检测数量，将相应数量的BV DNA PCR MIX，按照每孔20μL 的量分装至96 孔PCR 板或者PCR 八\n连管中。\n3. 核酸提取纯化\n使用核酸提取或纯化试剂盒对阴性对照，阳性对照，待测样本进行核酸的提取纯化，操作步骤参照核酸提取或\n纯化试剂盒说明书，内标加样量为10μL，样本量为200μL。牛血清、细胞基质样本可直接进行提取纯化，高浓度\n细胞样本建议离心取上清，特殊类型基质样本建议咨询宝锐生物技术支持。\n4. 扩增和检测\n4.1 按照20µL/管分装量将分别将BV RNA 反应体系和BV DNA PCR MIX 分装至反应管后，按下列表格分别加入无\n模板对照、阳性对照、阴性对照纯化液、阳性对照纯化液、待测样品纯化液：\nRNA 组分\n单孔用量（µL）\nDNA 组分\n单孔用量（µL）\nBV RNA 反应体系\n20\nBV DNA PCR MIX\n20\n模板\n20\n模板\n20\n总体积\n40\n总体积\n40\n*若不使用试剂盒内标功能，提取时无需添加内标，程序设置时不设置ROX 通道，结果分析时无需关注ROX 结果。\n",
  "版本：02 版\n3 / 4\n*若样品提取时未添加内标，扩增时加内标，则配制MIX 时每反应液加1µL 内标，分装扩增试剂时分装21µL/反应，\n此时PCR 总反应体积为41µL/反应。\n4.2 孔板排版布局可参考下表：\n1\n2\n3\n4\n5\n6\n7\n8\n9\n10\n11\n12\nA\nNTC\nS1\nS1\nPC\nPC\nS1\nS1\nNTC\nB\nNTC\nS2\nS2\nPC\nPC\nS2\nS2\nNTC\nC\nS3\nS3\nS3\nS3\nD\nS4\nS4\nS4\nS4\nE\nS5\nS5\nS5\nS5\nF\nS6\nS6\nS6\nS6\nG\nNCS\nS7\nS7\nPCS\nPCS\nS7\nS7\nNCS\nH\nNCS\nS8\nS8\nPCS\nPCS\nS8\nS8\nNCS\n*该示例表示的是检测1 个无模板对照NTC、1 个阴性对照样本NCS、1 个阳性对照PC、1 个阳性对照样品PCS、\n8 个待测样品，每个检测做2 个复孔，1-6 列为RNA 检测，7-12 列为DNA 检测。\n*实际检测时可根据样品多少，参照此示例进行排版布局。\n4.3 将上述配制好的反应液，盖好反应管盖，混匀后瞬时离心，转移到荧光PCR 仪器上。\n4.4 将反应管放置在荧光PCR 仪样品槽中，在荧光PCR 仪上运行以下程序（DNA 和RNA 检测程序相同）：\n步骤\n条件\n循环数\nUDG 处理\n25℃：2 分钟\n1\n反转录\n50℃：15 分钟\n1\n预变性\n95℃：3 分钟\n1\nPCR 扩增\n95℃：10 秒，60℃（采集荧光）：30 秒\n45\n荧光通道选择FAM、VIC、CY5、ROX，其中FAM、VIC（DNA 反应体系无此通道，无需关注该通道检测结果）、\nCY5 为靶标基因，ROX 为内标基因。若仪器为ABI 系列时，参比荧光选择none，DNA 反应体系无需选择VIC 通道。\nTaqMan 探针报告基团：\n报告基团\nDNA 反应体系检测目标\nRNA 反应体系检测目标\nFAM\nBPV-3\nREO-3\nVIC\n无此通道，无需关注该通道检测结果\nBPIV-3\nCY5\nBAV-3\nBVDV\nROX\nIC\nIC\n5. 结果判定\n5.1 阈值线的设定\n阈值线依据仪器噪声情况进行调整，将阈值线设置到超过本底信号波动位置。若需要手动调节，以刚好超过阴\n性对照品扩增曲线的最高点为准。阈值线设定应基于实验室验证数据，以满足检测限要求为基准。\n5.2 实验成立条件\n质控样品\n靶标信号（FAM/VIC/CY5）\n内标信号\n",
  "版本：02 版\n4 / 4\nNTC\n2 复孔Ct≥40 或扩增曲线无明显起峰\n2 复孔Ct<35 且有效的“S”型扩增\nNCS\n2 复孔Ct≥40 或扩增曲线无明显起峰\n2 复孔Ct<35 且有效的“S”型扩增\nPCS\n2 复孔Ct<35 且有效的“S”型扩增\n2 复孔Ct<35 且有效的“S”型扩增\nPC\n2 复孔Ct<35 且有效的“S”型扩增\n2 复孔Ct<35 且有效的“S”型扩增\n*质控标准应基于实验室验证数据，以满足检测限要求为基准。\n5.3 结果判定\n靶标信号（FAM/VIC/CY5）\n内标信号\n结果判断\n2 复孔有1 孔以上Ct<40 且有效的\n“S”型扩增\n2 复孔Ct<35 且有效的“S”型扩增\n阳性\n2 复孔Ct≥35 或扩增曲线无明显起峰\n阳性，有抑制\n2 复孔Ct≥40 或扩增曲线无明显起\n峰\n2 复孔Ct<35 且有效的“S”型扩增\n阴性\n2 复孔Ct≥35 或扩增曲线无明显起峰\n阴阳性无法判断，有抑制\n*ROX 信号如果有抑制，需重测或查找并排除抑制因子。\n*DNA 检测体系未添加VIC 信号，由于不同通道间信号的影响，可能导致该通道有异常曲线，无需关注该通道检测\n结果。\n【注意事项】\n1、试剂盒应在-20℃以下保存。\n2、实验前请仔细阅读本试剂盒说明书，严格按照操作步骤执行，在操作过程中对时间、试剂体积等精确控制可以\n获得最好的结果。\n3、核酸提取有关耗材确保洁净、无DNase/RNase，提取过程尽量快速，完成后进入下一步实验或冷冻保存。\n4、不要使用过期组分或者不同批次组分混合使用。\n5、冻存试剂使用前应于室温下完全融化，瞬时离心使液体完全沉于管底。避免反复冻融，以免影响试剂性能。\n6、要带新的一次性PE 手套对反应管封盖，避免徒手或使用过的手套接触反应管，检测过程中使用不带荧光物质一\n次性无粉乳胶手套。\n7、实验室应严格按照有关规定分区管理，依照配液区→模板提取区→扩增区→分析区顺序进行基因检测。各区间\n人员、器材、试剂及空气流向应有严格要求。\n8、样品、校准品等在使用后及时封盖，避免组分间及气溶胶等的污染造成假阳性。\n9、扩增产物禁止开盖，实验产生的废弃物应及时收集，远离PCR 实验室进行无害化处理。\n10、如果样本中靶标为强阳性时，由于体系的竞争抑制，可能会对内标检测造成影响。\n【免责声明】\n在所有情况下，本公司对此产品所承担的责任仅限于产品价值本身。\n【公司信息】\n邮箱：marketing@biori.com.cn\n网址：www.biori.com\n"
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 "官网品名": "牛源病毒（BVDV/REO3/BPIV3/BPV3/BAV3）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）【牛源病毒检测 生物制品质量控制分析】",
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 "说明书文件名": "BP-QN32-50 说明书",
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