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   "原文": "不同批号试剂盒中各组分不可以互换。"
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   "原文": "4、不要使用过期组分或者不同批次组分混合使用。"
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   "原文": "8、样品、校准品等在使用后及时封盖，避免组分间及气溶胶等的污染造成假阳性。"
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 "反应程序候选": [
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   "原文": "1、置于≤-20℃下避光保存，有效期24 个月。"
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   "原文": "1、试剂盒应在-20℃以下保存运输。"
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 "文中货号": [
  "ABI7500",
  "QN21-100"
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 "逐页文本": [
  "Sf9&AcNPV 残留DNA 检测试剂盒\n（PCR-荧光探针法）说明书\n货号：BP-QN21-100\n版本：02 版\n本产品仅供研究用\n珠海横琴宝锐生物科技有限公司\n",
  "版本：02 版\n1 / 3\n【产品名称】\nSf9&AcNPV 残留DNA 检测试剂盒（PCR-荧光探针法）\n【包装规格】\n100 Reactions/盒\n【预期用途】\n本试剂盒用于定量检测昆虫细胞（Sf9）-杆状病毒表达系统生产的基因工程疫苗中Sf9 细胞和杆\n状病毒（AcNPV）的残留DNA。\n【产品简介】\n本试剂盒采用PCR-荧光探针法，分别针对Sf9 细胞和AcNPV 的保守基因设计引物探针，能够\n定量检测昆虫细胞-杆状病毒表达系统生产的基因工程疫苗中Sf9 细胞和杆状病毒（AcNPV）的残留\nDNA。试剂盒含有内标，用于监控提取与扩增是否异常，防止假阴性的产生。本试剂盒含有UDG 酶，\n用于预防扩增产物的污染。\n本试剂盒与珠海横琴宝锐核酸提取或纯化试剂盒Ⅱ（磁珠法）或珠海横琴宝锐核酸提取或纯化试\n剂盒Ⅲ（磁珠法）配套使用。\n【主要成分与含量】\n试剂盒组分\n规格（100 Reactions/盒）\nSf9&AcNPV qPCR MIX\n1.0mL×2 管\nSf9&AcNPV 内标*\n1.0mL×1 管\nSf9&AcNPV 阴性对照\n1.0mL×2 管\nSf9&AcNPV 校准品ST1\n0.5mL×1 管（Sf9：3fg/μL；AcNPV：3copies/μL）\nSf9&AcNPV 校准品ST2\n0.5mL×1 管（Sf9：30fg/μL；AcNPV：3×101 copies/μL）\nSf9&AcNPV 校准品ST3\n0.5mL×1 管（Sf9：300fg/μL；AcNPV：3×102 copies/μL）\nSf9&AcNPV 校准品ST4\n0.5mL×1 管（Sf9：3pg/μL；AcNPV：3×103 copies/μL）\nSf9&AcNPV 校准品ST5\n0.5mL×1 管（Sf9：30pg/μL；AcNPV：3×104 copies/μL）\nSf9&AcNPV 校准品ST6\n0.5mL×1 管（Sf9：300pg/μL；AcNPV：3×105 copies/μL）\n说明：\n不同批号试剂盒中各组分不可以互换。\n实验操作中需要但试剂盒中未提供的试剂：核酸提取或纯化试剂盒。\n*若不使用试剂盒内标功能，提取时无需添加内标，程序设置时不设置CY5 通道，结果分析时无需关\n注CY5 结果。\n*若样品提取时未添加内标，扩增时加内标，则配制MIX 时每反应液加1μL 内标，分装qPCR MIX\n时分装21μL/反应，此时PCR 总反应体积为41μL/反应。\n【储存条件及有效期】\n1、置于≤-20℃下避光保存，有效期24 个月。\n2、避免反复冻融，反复冻融次数不超过10 次。\n3、产品有效期及失效日期见标签。\n【适用机型】\n包括但不限于以下机型：SLAN-96P、SLAN-96S 全自动医用PCR 分析系统；ABI7500、ABl\nQuantStudio™5 实时荧光定量PCR 仪；Roche LightCycler 480 荧光定量PCR 仪；伯乐CFX96\n定量PCR 仪。\n【检验方法】\n从试剂盒中取出Sf9&AcNPV qPCR MIX、Sf9&AcNPV 内标、Sf9&AcNPV 阴性对照、\nSf9&AcNPV 校准品ST1~ST6，置于室温融化，充分震荡混匀后瞬时离心备用。\n",
  "版本：02 版\n2 / 3\n1. 加样回收质控ERC 制备\n根据需要设置ERC 中的Sf9&AcNPV 加样浓度（以制备AcNPV 加标3×104copies 的ERC 为\n例），具体操作如下：\n1）取100μL 待测样本加入1.5mL 干净的离心管中。\n2）加入10μL Sf9&AcNPV 校准品ST4 后混匀瞬时离心，标记为样本ERC。样本ERC 和同批待测样\n本一起进行核酸提取纯化，得到的核酸即为样本ERC 核酸。\n2. 反应液准备\n2.1 根据待测标本数，计算所需的PCR 反应液数，一般建议做3 个重复/样本。\nPCR 反应液数=（6 个浓度梯度的标准曲线+1 个无模板对照NTC+1 个阴性质控NCS +待测样\n本+待测样本ERC）×3。然后按照20μL/反应的量将Sf9&AcNPV qPCR MIX 反应液分装至96 孔\nPCR 板或者PCR 八连管中。\n2.2 各反应孔加样示例：\n组分\n加样量\n标准曲线\n20μL Sf9&AcNPV qPCR MIX + 20μL ST1/ST2/ST3/ST4/ ST5/ST6\nNTC\n20μL Sf9&AcNPV qPCR MIX + 20μL 阴性对照\nNCS\n20μL Sf9&AcNPV qPCR MIX + 20μL NCS 纯化液\n待测样本\n20μL Sf9&AcNPV qPCR MIX + 20μL 待测样本纯化液\n样本ERC\n20μL Sf9&AcNPV qPCR MIX + 20μL 样本ERC 纯化液\n3. 样本核酸提取：\n操作步骤参照核酸提取或纯化试剂盒说明书，样本量为100μL，内标添加量为10μL。\n4. 荧光PCR 反应：\n4.1 按照2.2 的方法将核酸加入到Sf9&AcNPV qPCR MIX 中，盖好反应管盖或者用光学膜封闭96\n孔PCR 板，混匀后瞬时离心，转移到荧光PCR 仪器上。\n4.2 在荧光PCR 仪上运行以下程序：\n步骤\n条件\n循环数\nUDG 处理\n50℃：2 分钟\n1\n预变性\n95℃：3 分钟\n1\nPCR 扩增\n95℃：10 秒，60℃（采集荧光）：30 秒\n45\n荧光通道选择FAM、ROX、CY5，其中FAM 为Sf9 基因，ROX 为AcNPV 基因，CY5 为内标。\n若仪器为ABI 系列，参比荧光选择none。\n5. 结果判定\n5.1 阈值线设定\n阈值线依据仪器噪声情况进行调整，将阈值线设置到超过本底信号波动位置。\n5.2 内标的判读\n对于阴性结果内标Ct 值应≤35；对于阳性结果，可能会因为竞争抑制，导致阳性结果内标不出\n值或者出值较差。\n5.3 试验成立条件\nNTC，NCS 的FAM 及ROX 通道显示无Ct 值或无典型扩增曲线；标准曲线线性相关性R2＞0.98。\n6. 结果分析\n6.1 以SLAN-96P 为例：\n1）若需要调整阈值线，在“实验分析”面板的“参数设置”中，将阈值设置到超过本底信号波动位\n置。\n2）在“孔板编辑”面板中，将校准品的“样本类型”一栏设置为标准品，并且在“属性”一栏通道\n",
  "版本：02 版\n3 / 3\n1 或通道3 分别赋值为3、3×101、3×102、3×103、3×104、3×105（含义为每孔的Sf9 或AcNPV\n浓度，单位为fg/μL 或copies/μL），并且在相应的“样本名称”一栏中命名为ST1、ST2、ST3、\nST4、ST5、ST6。\n3）在“实验分析”的“标准曲线”面板中，可读取标准曲线的斜率、截距、相关系数、扩增效率。\n4）在“实验分析”的“反应孔信息表”面板中，“浓度”一栏可读取检测结果的浓度值，单位为fg/\nμL 或copies/μL。根据待测样本和样本ERC 的检测结果计算加样回收率，加样回收率要求在\n50%-150%之间。\n6.2 以ABI 公司7500 qPCR 仪、软件版本2.4 为例：\n1）若需要调整阈值线，在Analysis 的Amplification Plot 面板中，将FAM 通道、ROX 通道、CY5\n通道Threshold 设置到超过本底信号波动位置，点击Analyze；\n2）在Setup 的Plate Setup 面板中，将标准曲线孔的Task 一栏设置为Standard，并且在Quantity\n一栏分别赋值为3、3×101、3×102、3×103、3×104、3×105（含义为每孔的Sf9 或AcNPV 浓度，\n单位为fg/μL 或copies/μL），并且在相应的Sample 一栏中命名为ST1、ST2、ST3、ST4、ST5、\nST6。将无模板对照NTC 孔的Task 一栏设置为NTC，将阴性质控NCS 孔、待测样本孔、样本ERC\n孔的Task 一栏设置为Unknown，并且在相应的Sample Name 一栏中命名为NTC、NCS、S、ERC；\n3）在Analysis 的Standard Curve 面板中，可读取标准曲线的Slope、Y-Inter、R2 等；\n4）在Analysis 的View Well Table 面板中，Quantity 一栏可读取检测结果的浓度值，单位为fg/μ\nL 或copies/μL。根据待测样本和样本ERC 的检测结果计算加样回收率，加样回收率要求在\n50%-150%之间。\n【注意事项】\n1、试剂盒应在-20℃以下保存运输。\n2、实验前请仔细阅读本试剂盒说明书，严格按照操作步骤执行，在操作过程中对时间、试剂体积等\n精确控制可以获得最好的结果。\n3、核酸提取有关耗材确保洁净、无DNase/RNase，提取过程尽量低温、快速，完成后进入下一步\n实验或冷冻保存。\n4、不要使用过期组分或者不同批次组分混合使用。\n5、冻存试剂使用前应于室温下完全融化，瞬时离心使液体完全沉于管底。避免反复冻融，以免影响\n试剂性能。\n6、对于顶部采光仪器要带新的一次性PE 手套对反应管封盖，对于底部采光仪器要避免徒手或使用\n过的手套接触反应管底，检测过程中使用不带荧光物质一次性无粉乳胶手套。\n7、实验室应严格按照有关规定分区管理，依照配液区→模板提取区→扩增区→分析区顺序进行基因\n检测。各区间人员、器材、试剂及空气流向应有严格要求。\n8、样品、校准品等在使用后及时封盖，避免组分间及气溶胶等的污染造成假阳性。\n9、扩增产物禁止开盖，实验产生的废弃物应及时收集，远离PCR 实验室进行无害化处理。\n10、如果样本中靶标为强阳性时，由于体系的竞争抑制，可能会对内标检测造成影响。\n【免责声明】\n在所有情况下，本公司对此产品所承担的责任仅限于产品价值本身。\n【公司信息】\n邮箱：marketing@biori.com.cn\n网址：www.biori.com\n"
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 "官网品名": "Sf9&AcNPV残留DNA检测试剂盒（PCR-荧光探针法）【宿主细胞残留DNA检测 】",
 "详情页": "https://www.biori.com/product/44710",
 "说明书URL": "https://qipeima.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/uploads/qipeima/299/05aa6382/24/09/4d8dd87cf2cb85e427f492c181c8ea3747766202.pdf",
 "说明书文件名": "BP-QN21-100 说明书",
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