{
 "页数": 4,
 "全文字符数": 3804,
 "体系配置候选": [
  {
   "页": 2,
   "原文": "试剂盒组分"
  },
  {
   "页": 2,
   "原文": "不同批号试剂盒中各组分不可以互换。"
  },
  {
   "页": 3,
   "原文": "单孔用量（µL）"
  },
  {
   "页": 4,
   "原文": "4、不要使用过期组分或者不同批次组分混合使用。"
  },
  {
   "页": 4,
   "原文": "8、样品、校准品等在使用后及时封盖，避免组分间及气溶胶等的污染造成假阳性。"
  }
 ],
 "反应程序候选": [
  {
   "页": 2,
   "原文": "1、置于≤-20℃下避光保存，有效期24 个月。"
  },
  {
   "页": 3,
   "原文": "25℃：5 分钟"
  },
  {
   "页": 3,
   "原文": "50℃：30 分钟"
  },
  {
   "页": 3,
   "原文": "95℃：3 分钟"
  },
  {
   "页": 3,
   "原文": "95℃：10 秒，60℃（采集荧光）：30 秒"
  },
  {
   "页": 4,
   "原文": "1、试剂盒应在-20℃以下保存运输。"
  }
 ],
 "文中货号": [
  "ABI7500",
  "QN14-100"
 ],
 "逐页文本": [
  "RCR 基因拷贝数检测试剂盒\n（PCR-荧光探针法）说明书\n货号：BP-QN14-100\n版本：02 版\n本产品仅供研究用\n珠海横琴宝锐生物科技有限公司\n",
  "版本：02 版\n1 / 3\n【产品名称】\nRCR 基因拷贝数检测试剂盒（PCR-荧光探针法）\n【包装规格】\n100 Reactions/盒\n【预期用途】\n本试剂盒用于定量检测逆转录病毒载体生产的细胞治疗产品和基因治疗产品中可复制型逆转录\n病毒RCR。\n【产品简介】\n本试剂盒采用PCR-荧光探针法，针对GALV 基因设计引物探针，能够定量检测细胞治疗产品和\n基因治疗产品中可复制型逆转录病毒RCR 的拷贝数。试剂盒含有内标，用于监控提取与扩增是否异\n常，防止假阴性的产生。本试剂盒含有UDG 酶，用于预防扩增产物的污染。\n本试剂盒与珠海横琴宝锐核酸提取或纯化试剂盒Ⅲ（磁珠法）配套使用。\n【主要成分与含量】\n试剂盒组分\n规格（100 Reactions/盒）\nRCR qPCR MIX1\n0.9mL×2 管\nRCR qPCR MIX2\n0.2mL×1 管\nRCR 阴性对照\n1.0mL×2 管\nRCR 校准品ST1\n0.5mL×1 管（5×100copies/μL）\nRCR 校准品ST2\n0.5mL×1 管（5×101copies/μL）\nRCR 校准品ST3\n0.5mL×1 管（5×102copies/μL）\nRCR 校准品ST4\n0.5mL×1 管（5×103copies/μL）\nRCR 校准品ST5\n0.5mL×1 管（5×104copies/μL）\nRCR 校准品ST6\n0.5mL×1 管（5×105copies/μL）\n说明：\n不同批号试剂盒中各组分不可以互换。\n实验操作中需要但试剂盒中未提供的试剂：核酸提取或纯化试剂盒。\n【储存条件及有效期】\n1、置于≤-20℃下避光保存，有效期24 个月。\n2、避免反复冻融，反复冻融次数不超过10 次。\n3、产品有效期及失效日期见标签。\n【适用机型】\n包括但不限于以下机型：SLAN-96P、SLAN-96S 全自动医用PCR 分析系统；ABI7500、ABl\nQuantStudio™5 实时荧光定量PCR 仪；Roche LightCycler 480 荧光定量PCR 仪；伯乐CFX96\n定量PCR 仪。\n【检验方法】\n从试剂盒中取出RCR qPCR MIX1、RCR qPCR MIX2、RCR 阴性对照、RCR 校准品ST1-ST6，\n置于室温融化，充分震荡混匀后瞬时离心备用。\n1. 加样回收质控ERC 制备\n根据需要设置ERC 中的RCR 加样浓度（以制备加5×105copies 线性RCR 的ERC 为例），具体\n操作如下：\n1）取100μL 待测样本加入1.5mL 干净的离心管中。\n",
  "版本：02 版\n2 / 3\n2）加入10μL RCR 校准品ST5 后混匀瞬时离心，标记为样本ERC。样本ERC 和同批待测样本一起\n进行核酸提取纯化，得到的核酸即为样本ERC 核酸。\n2. 反应液准备\n2.1 根据待测标本数，计算所需的PCR 反应液数，一般建议做3 个重复/样。\nPCR 反应液数=（6 个浓度梯度的标准曲线+1 个无模板对照NTC+1 个阴性质控NCS+待测样\n本+待测样本ERC）×3+1 孔损耗量。然后按照20μL/反应的量将RCR qPCR MIX 反应液分装至96\n孔PCR 板或者PCR 八连管中（RCR qPCR MIX 配制方法参考2.2 表格）。\n2.2 RCR qPCR MIX 配制方法：\n组分\n单孔用量（µL）\nRCR qPCR MIX1\n18\nRCR qPCR MIX2\n2\n总体积\n20\n2.3 各反应孔加样示例：\n组分\n加样量\n标准曲线\n20μL RCR qPCR MIX + 20μL ST1/ST2/ST3/ST4/ ST5/ST6\nNTC\n20μL RCR qPCR MIX + 20μL 阴性对照\nNCS\n20μL RCR qPCR MIX + 20μL NCS 纯化液\n待测样本\n20μL RCR qPCR MIX + 20μL 待测样本纯化液\n样本ERC\n20μL RCR qPCR MIX + 20μL 样本ERC 纯化液\n3. 样本核酸提取\n操作步骤参照核酸提取或纯化试剂盒说明书，样本量为100μL。\n4. 荧光PCR 反应\n4.1 按照2.3 的方法将核酸加入到RCR qPCR MIX 中，盖好反应管盖或者用光学膜封闭96 孔PCR\n板，混匀后瞬时离心，转移到荧光PCR 仪器上。\n4.2 在荧光PCR 仪上运行以下程序：\n步骤\n条件\n循环数\nUDG 处理\n25℃：5 分钟\n1\n反转录\n50℃：30 分钟\n1\n预变性\n95℃：3 分钟\n1\nPCR 扩增\n95℃：10 秒，60℃（采集荧光）：30 秒\n45\n荧光通道选择FAM、ROX，其中FAM 为RCR 基因，ROX 为内标。若仪器为ABI 系列，参比荧\n光选择none。\n5. 结果判定\n5.1 阈值线设定\n阈值线依据仪器噪声情况进行调整，需要根据扩增曲线自行调整阈值线。\n5.2 内标的判读\n对于阴性结果内标Ct 值应≤33；对于阳性结果，可能会因为竞争抑制，导致阳性结果内标不出\n值或者出值较差。\n5.3 试验成立条件\nNTC、NCS 的FAM 通道显示无Ct 值或无典型扩增曲线；标准曲线线性相关性R2＞0.98。\n6. 结果分析\n",
  "版本：02 版\n3 / 3\n6.1 以SLAN-96P 为例：\n1）若需要调整阈值线，在“实验分析”面板的“参数设置”中，将阈值设置到合适高度；\n2）在“孔板编辑”面板中，将校准品的“样本类型”一栏设置为标准品，并且在“属性”一栏分别\n赋值为5×105、5×104、5×103、5×102、5×101、5（含义为每孔的RCR 浓度，单位为copies/μL），\n并且在相应的“样本名称”一栏中命名为ST6、ST5、ST4、ST3、ST2、ST1；\n3）在“实验分析”的“标准曲线”面板中，可读取标准曲线的斜率、截距、相关系数、扩增效率；\n4）在“实验分析”的“反应孔信息表”面板中，“浓度”一栏可读取检测结果的浓度值，单位为\ncopies/μL。根据待测样本和样本ERC 的检测结果计算加样回收率，加样回收率要求在50%-150%\n之间。\n6.2 以ABI 公司7500 qPCR 仪、软件版本2.4 为例：\n1）若需要调整阈值线，在Analysis 的Amplification Plot 面板中，将FAM 通道、ROX 通道Threshold\n设置到合适高度，点击Analyze；\n2）在Setup 的Plate Setup 面板中，将标准曲线孔的Task 一栏设置为Standard，并且在Quantity\n一栏分别赋值为5×105、5×104、5×103、5×102、5×101、5（含义为每孔的RCR 浓度，单位为\ncopies/μL），并且在相应的Sample 一栏中命名为ST6、ST5、ST4、ST3、ST2、ST1。将无模板\n对照NTC 孔的Task 一栏设置为NTC，将阴性质控NCS 孔、待测样本孔、样本ERC 孔的Task 一栏\n设置为Unknown，并且在相应的Sample Name 一栏中命名为NTC、NCS、S、ERC；\n3）在Analysis 的Standard Curve 面板中，可读取标准曲线的Slope、Y-Inter、R2 等；\n4）在Analysis 的View Well Table 面板中，Quantity 一栏可读取检测结果的浓度值，单位为copies/\nμL。根据待测样本和样本ERC 的检测结果计算加样回收率，加样回收率要求在50%-150%之间。\n【注意事项】\n1、试剂盒应在-20℃以下保存运输。\n2、实验前请仔细阅读本试剂盒说明书，严格按照操作步骤执行，在操作过程中对时间、试剂体积等\n精确控制可以获得最好的结果。\n3、核酸提取有关耗材确保洁净、无DNase/RNase，提取过程尽量低温、快速，完成后进入下一步\n实验或冷冻保存。\n4、不要使用过期组分或者不同批次组分混合使用。\n5、冻存试剂使用前应于室温下完全融化，瞬时离心使液体完全沉于管底。避免反复冻融，以免影响\n试剂性能。\n6、对于顶部采光仪器要带新的一次性PE 手套对反应管封盖，对于底部采光仪器要避免徒手或使用\n过的手套接触反应管底，检测过程中使用不带荧光物质一次性无粉乳胶手套。\n7、实验室应严格按照有关规定分区管理，依照配液区→模板提取区→扩增区→分析区顺序进行基因\n检测。各区间人员、器材、试剂及空气流向应有严格要求。\n8、样品、校准品等在使用后及时封盖，避免组分间及气溶胶等的污染造成假阳性。\n9、扩增产物禁止开盖，实验产生的废弃物应及时收集，远离PCR 实验室进行无害化处理。\n10、如果样本为强阳性时，由于体系的竞争抑制，可能会对内标检测造成影响。\n11、建议使用各仪器新版本的软件进行实验及数据分析。\n【免责声明】\n在所有情况下，本公司对此产品所承担的责任仅限于产品价值本身。\n【公司信息】\n邮箱：marketing@biori.com.cn\n网址：www.biori.com\n"
 ],
 "官网品名": "RCR基因拷贝数检测试剂盒（PCR-荧光探针法）【外源基因拷贝数检测 生物医药】",
 "详情页": "https://www.biori.com/product/44655",
 "说明书URL": "https://qipeima.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/uploads/qipeima/299/05aa6382/24/09/b4c9a9a84fac3297004159a2a233f951b44ab694.pdf",
 "说明书文件名": "BP-QN14-100 说明书",
 "PDF字节": 298075
}