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 "体系配置候选": [
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   "原文": "1.2 推荐用量：每50pmol RNA 使用20μl 体系进行加帽。"
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   "原文": "1. 加帽反应对RNase 高度敏感，反应体系须严格注意不要混入RNase，实验器材如移液枪头，EP 管严格使用RNase-free"
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 "反应程序候选": [
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   "原文": "2.2 加帽反应前建议对RNA 进行热变性处理，65℃加热5min，取出后立即冰上放置5min。"
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   "原文": "2. 本加帽反应效率受RNA 5'端结构影响，因此建议通过热变性（65℃加热5 min，冰上放置5 min）打开RNA 5'端的高级结"
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 "文中货号": [
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  "E06"
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 "逐页文本": [
  "mRNA 加帽试剂盒（50T）\n货号：BP-04-50\n2025V02\n产品概述\n宝锐生物自主研发的mRNA 加帽试剂盒，内部含有牛痘病毒加帽酶Vaccinia Capping Enzyme（VCE）和二氧甲基转移酶2\n´-O-Methyltransferase（2OM）。Vaccinia Capping Enzyme 能高效地对mRNA 的5'端添加m7G 帽子，即生产Cap0 帽\n结构的RNA。2´-O-Methyltransferase 对Cap0 帽结构的RNA，在帽结构后第一个核苷酸的2´-O 位置处增加一个甲基，形\n成Cap1 帽结构的RNA。\n本试剂盒可在一管反应中同时进行VCE 和2OM 加帽，直接获得Cap1 帽结构RNA，能极大提高mRNA 在细胞内的稳定性，\n促进翻译效率。\n试剂组成\n组分\n货号\n体积\nVaccinia Capping Enzyme\nBP-E05\n50μL\n2'-O-Methyltransferase\nBP-E06\n50μL\n10× Capping Buffer\nBP-AS-12\n100μL\nGTP Solution (10mM)\nBP-AS-02\n50μL\nSAM (32mM)\nBP-AS-06\n25μL\nRNase Inhibitor (40U/μL)\nBP-E02\n50μL\nRNase-free ddH2O\nBP-AS-11\n1mL\n保存条件\n-20±5℃存储。\n操作说明\n1. mRNA 制备\n1.1 制备足量的mRNA，回收后用RNase-free-ddH2O 重悬，测定浓度。\n1.2 推荐用量：每50pmol RNA 使用20μl 体系进行加帽。\n1.3 50pmol RNA 含量粗算：RNA 用量(ng)= 0.05nmol×330g/mol×X nt (X=RNA 碱基数)。\n2. 加帽反应\n2.1 取出SAM（32mM）放置在冰上解冻，使用时将其稀释至4mM 添加至反应液；GTP（10mM）和10×Capping Buffer\n室温下解冻即可。由于甲基供体SAM 属于高能甲基供体，其本身性质不稳定，建议全程在低温下加样。\n2.2 加帽反应前建议对RNA 进行热变性处理，65℃加热5min，取出后立即冰上放置5min。\n2.3 按下表依次加入各组分：\n组分\n体积\n10× Capping Buffer\n2μL\nGTP Solution(10mM)\n1μL\nSAM (4mM)\n1μL\n",
  "mRNA 加帽试剂盒（50T）\n货号：BP-04-50\n2025V02\nVaccinia Capping Enzyme\n1μL\n2'-O-Methyltransferase\n1μL\nRNase Inhibitor\n0.5μL\nDenatured RNA\n50pmoL\nRNase-free ddH2O\nUp to 20μL\n*37℃孵育1h 即可完成加帽。若需要使用同等酶量使更多RNA 加帽，可适当延长37℃孵育时间至2h。\n2.4 反应终止\n70℃加热10min。\n3. 浓度及活性定义：10U/μL\n3.1\n1U VCE 指37℃条件下，1 小时将10pmol GTP 掺入RNA 上所需的酶量。\n3.2\n1U 2OM 指37℃条件下，1 小时将10pmol 甲基掺入Gap0 RNA 上所需的酶量。\n注意事项\n1. 加帽反应对RNase 高度敏感，反应体系须严格注意不要混入RNase，实验器材如移液枪头，EP 管严格使用RNase-free\n用品。体系的配制尽可能在无酶环境中配制，可使用清洁后的洁净工作台进行此操作，合成的RNA 也尽可能避免在洁净工作\n台以外的区域开盖，以避免RNase 的污染。\n2. 本加帽反应效率受RNA 5'端结构影响，因此建议通过热变性（65℃加热5 min，冰上放置5 min）打开RNA 5'端的高级结\n构。\n3. 本加帽反应一般可以在1h 内完成，若RNA 5'端结构复杂或RNA 长度较短(≤200 nt)，可延长反应时间至2h。\n4. 使用前应混匀，避免反复冻融。\n"
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 "官网品名": "mRNA加帽试剂盒【环状RNA合成与纯化 】",
 "详情页": "https://www.biori.com/product/44749",
 "说明书URL": "https://qipeima.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/uploads/qipeima/299/05aa6382/25/07/7b75cc03b5dba70ed54c43a336e9f4a287321af9.pdf",
 "说明书文件名": "BP-04-50 说明书",
 "PDF字节": 1315469
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