M5341-014804、M5341-014805 和FM5101-136104 快速扩增对比
（人总引探和呼吸道引探）
1. 实验方法
在48S 快速程序中测试M5341-014804、M5341-014804 和FM5101-136104
对比。测试qRT 四重和呼吸道四重检测体系。
1.1 实验分组
1.2 引探
25×qRT 四重Pbmix，2μl/25μl；25×呼吸道四重Pbmix，2μl/25μl；
1.3 模板
1)人总：0.464 pg/μl，2T；4.64 pg/μl，2T；5μl/T。
2)呼吸道：0.8copies/μl，2T；8copies/μl，2T；5μl/T。
1.4 扩增程序
1）48S 快速程序（31min），50℃
2min；90℃30 s；60℃5min；95℃30s；45cycles
(95℃1s，60℃7 s)
2. 实验结果（绝对分析法）
2.1 扩增曲线
分组
编号
分组内容
组1
M5341-014804
组2
M5341-014805
组3
FM5101-136104
qRT 四重
M5341-014804
M5341-014805
FM5101-136104
通道
FAM
VIC
ROX
CY5

2.2 Ct 值统计（阈值均为20）
1) qRT 四重
扩增曲线
原始曲线
呼吸道四重
M5341-014804
M5341-014805
FM5101-136104
通道
FAM
VIC
ROX
CY5
扩增曲线
原始曲线
分
组
Ct
值
通道
Ct 值
Rn 值
FAM
VIC
ROX
CY5
FAM
VIC
ROX
CY5
M5341-014804
0.464pg/μl
31.36
33.03
31.73
34.32
896
324
1075
552
4.64pg/μl
28.12
29.89
28.27
30.92
1106
380
1418
688
M5341-014805
0.464pg/μl
31.41
33.22
31.73
34.39
1111
366
1272
594
4.64pg/μl
28.11
29.93
28.65
31.20
1207
403
1398
710
FM5101-136104
0.464pg/μl
32.57
32.85
31.97
34.16
804
323
1104
385
4.64pg/μl
29.49
30.14
28.93
31.54
984
342
1388
586

2) 呼吸道四重
3. 小结
1) 在qRT 四重快速扩增中（31min），M5341-014804 和M5341-014805 扩
增略优于FM5101-136104，在FAM 通道扩增提前1 个Ct 值，CY5 通道Rn 值
高50%。
2) 在呼吸道快速程序中（31min），M5341-014805 显著优于M5341-014804
和FM5101-136104。
4. 下一步计划：
在快速扩增中，M5341-014804 和M5341-014805 较136104 有明显优势。
分
组
Ct
值
通道
Ct 值
Rn 值
FAM
VIC
ROX
CY5
FAM
VIC
ROX
CY5
M5341-014804
0.8copies/μl
NoCt
33.65
36.51
37.19
/
1206
1379
474
8copies/μl
37.19
33.58
34.12
33.48
502
1244
2258
1003
M5341-014805
0.8copies/μl
35.86
33.99
34.98
36.82
989
1198
1731
482
8copies/μl
31.87
34.25
31.15
33.09
2094
1081
2982
845
FM5101-136104
0.8copies/μl
NoCt
35.39
NoCt
37.80
/
606
/
293
8copies/μl
37.90
34.10
35.98
35.98
233
850
1450
490